本发明公开了一种蛹虫草多糖多维指纹图谱的构建方法，涉及中药和功能食品原料及其制品的指纹图谱技术领域。包括从蛹虫草中提取蛹虫草多糖，将提取的蛹虫草多糖，经紫外吸收光谱指纹分析、傅里叶变换红外光谱指纹分析和高效凝胶渗透色谱法指纹分析，获得蛹虫草多糖的UV光谱标准指纹图谱、IR光谱标准指纹图谱和HPGPC色谱标准指纹图谱的多维指纹图谱构建方法。本发明方法具有操作简单、稳定、灵敏、精密度高、重现性好等优点，能从色谱的整体特征面貌上把握蛹虫草多糖质量情况，为蛹虫草质量控制和真伪鉴别提供了新的科学方法。