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一种盐酸黄酮哌酯的荧光测定方法

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成果名称: 一种盐酸黄酮哌酯的荧光测定方法 关键字: 应用行业: 医药制造业
高新技术领域: 医药技术 所在地: 河北省 知识产权类型: 发明专利
知识产权编号: ZL201510215149 成果体现形式: 发明专利 成果属性:
成果所处阶段: 成果水平: 请选择... 研究形式:
学科分类: 战略新兴产业: 请选择... 课题来源:
第一完成单位名称: 河北工业职业技术学院 第一完成单位属性: 技术成熟度:
合作方式: 请选择... 交易价格(万): 2.00 所属十强产业:

一种盐酸黄酮哌酯的荧光测定方法,包括如下步骤:盐酸黄酮哌酯片的样品溶液的制备、绘制一系列浓度的FX标准曲线和测定样品浓度。测定样品浓度时将稀释后的样品溶液中在强碱性环境下沸水浴中加热,冷却后使用荧光分光光度计扫描荧光光谱,测量λex/λem=302/410nm的荧光强度,计算出样品溶液中FX的浓度。本发明利用荧光测定方法测定盐酸黄酮哌酯片中的FX含量,灵敏度高,分析速度快,测试条件简便,环境友好,而且所需样品用量大大减少。

本发明利用FX在强碱性水溶液中有荧光增强现象,加热可加速荧光物质产生的原理,通过测定MFA分子γ-吡喃酮环分解后所形成产物的荧光,用标准曲线法计算得出FX的浓度,解决了FX和MFA化合物自身荧光较弱,表面活性剂也不能使其产生敏化荧光的问题。利用荧光分析方法测定盐酸黄酮哌酯片中的FX含量,灵敏度高,分析速度快,测试条件简便,环境友好。与Zaazaa等人报道的荧光分析法相比,本发明的检出限为1.1ng/mL,灵敏度约高70倍。其报道的荧光分析法为先将片剂样品在1.0 mol/L NaOH溶液中水解3h,然后用HCl调节pH至中性,蒸干溶液,再用甲醇溶解残渣后测量荧光;而本法为样品经甲醇溶剂提取后在强碱性水溶液中沸水浴加热2 h,冷却至室温后测量荧光即可,操作简便、省时,同时在水溶液中测定较甲醇溶液中测定环境友好。反应体系在沸水浴中加热可加速裂解反应的进行,缩短反应时间。与药典记载的紫外分光光度法比较,紫外分光光度法所需药物浓度为2 μg/mL,本法分析所需药物是它的十分之一,用药量大大减少。

盐酸黄酮哌酯(3-甲基黄酮-8-羧酸乙哌啶基酯盐酸盐,Flavoxate hydrochloride,FX)属于黄酮类化合物,是一种平滑肌松弛药,对泌尿生殖系统的平滑肌有选择性的解痉作用,临床上以片剂或胶囊的形式用于治疗各种下尿路感染或梗阻性疾病,可以消除尿频、尿急、尿失禁及尿道膀胱平滑肌痉挛引起的下腹部疼痛。药代动力学研究表明,FX在静脉给药或口服给药时,在体内迅速吸收并代谢成3-甲基黄酮-8-羧酸(MFA),从尿中排出。定量分析FX及其代谢产物MFA在药剂、血液、尿液等样品中的方法有很多种,包括紫外分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、荧光分析法和膜电位法等。其中对于盐酸黄酮哌酯片剂比较普遍的分析方法是2010版药典紫外分光光度法,将药物片剂研磨后用盐酸溶液溶解,利用紫外-可见分光光度法测定293 nm波长下的吸光度,对照标品计算出药物含量。由于盐酸黄酮哌酯在此波长下的紫外吸收强度弱,因此该方法所需药物浓度为20μg/mL,药物样品消耗量大。而高效液相色谱法,分析检测速度慢,药品及溶剂消耗量大。
荧光分析法具有灵敏度高、分析速度快、手续简便和环境友好等优点,在药物分析中的应用已有不少研究报道。但是,黄酮类化合物的内源荧光普遍不强,有应用价值的荧光分析方法不多。2015年,埃及人Zaazaa等报道了尿液中FX代谢产物MFA的荧光分析方法,并用于泌尿灵片剂中FX的测定。此方法将FX在碱性条件下水解,然后用HCl调节pH至中性,蒸干溶液,再用甲醇溶解残留物后测定荧光,MFA甲醇溶液的荧光峰位于λex / λem= 338 / 390 nm。由于MFA本身荧光强度较弱,表面活性剂也不能敏化该化合物,因此MFA甲醇溶液的测试浓度是4 μg/mL,且测定灵敏度不高。


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