本发明公开了一种用于测定莠去津生物毒性的铜绿微囊藻藻液的制备方法，其步骤包括：A、铜绿微囊藻的培养；B、铜绿微囊藻叶绿素荧光参数的确定，使用荧光光谱仪进行叶绿素荧光参数的测定；C、稀释至不同浓度的铜绿微囊藻与其光密度关系测定；D、铜绿微囊藻浓度-叶绿素荧光曲线的建立；E、用于测定莠去津生物毒性铜绿微囊藻藻液的获取，用经过高压灭菌的蒸馏水稀释生长至对数期的铜绿微囊藻，使其在680nm处的OD值为0.3-0.5，该稀释后的藻液即可用于莠去津生物毒性测定。利用本发明制备的藻液能够简便、快速的测定莠去津的生物毒性，成本低廉，绿色环保。