本发明公开了一种基于合金纳米簇的叶酸含量检测方法。包括以下步骤：（a）对待测样品进行预处理得到待测溶液，（b）配置DPA@Ag/Cu合金纳米簇水溶液，（c）将待测溶液与DPA@Ag/Cu合金纳米簇水溶液混合得到检测液，用缓冲液调节检测液pH为2.36~3.29，然后将检测液孵育后在激发波长为353 nm下进行检测，在500~650 nm范围内收集荧光发射光谱，得到检测液荧光猝灭值；（d）通过预先测定的标准曲线计算得到待测样品的叶酸含量。本发明具有高选择性和高灵敏度的优点。该FA传感器可用于实际样品中FA的检测，回收率为79.3%‑121.8%。

本发明构建了一种在水溶液中以Ag/Cu 合金纳米簇 (DPA@Ag/Cu NCs)为探针利用荧光光谱法检测药品中FA含量的应用技术，该方法操作简单，选择性高、灵敏度高，具有一定的优势和应用前景。大部分常见无机离子、糖类、维生素和二十种氨基酸对检测FA无干扰。Fe 和Cu 对检测FA有一定的干扰，可以分别使用半胱氨酸(Cys)和EDTA掩蔽剂掩蔽，排除干扰。

 叶酸（FA）是一种水溶性维生素，又名喋酰谷氨酸，叶酸含有1个或多个谷氨酰基，天然存在的叶酸大都是多谷氨酸形式，广泛存在于动物、植物性食物中。叶酸参与嘌呤、嘧啶的合成，因此叶酸在蛋白质合成及细胞分裂与生长过程中具有重要作用，对正常红细胞的形成有促进作用。叶酸缺乏可致红细胞中血红蛋白生成减少、细胞成熟受阻，导致巨幼红细胞性贫血。人体中FA的缺乏会导致许多疾病，例如癌症，痴呆症和唐氏综合症。 FA可以降低体内同型半胱氨酸的水平，对心血管疾病有积极作用。由于人体无法自由合成脂肪酸，因此必须从外部食物中获取，尤其是孕妇。世界卫生组织（WHO）报告了FA的推荐营养摄入量。怀孕期间充足的FA可减少神经管缺陷和无脑的发生率。孕妇每天摄入的FA总量为600 µg，哺乳期为500 µg。 FA是胎儿生长发育必不可少的营养素。12个月以下婴儿的安全摄入量为每天80 µg；2至3岁儿童的安全摄入量为每天150 µg；4至6岁儿童的安全摄入量为每天200 µg，7至9岁儿童的安全摄入量为每天300 µg；青少年和成人的安全摄入量为每天400 µg，可以满足人类生长和维持正常血液的需求。因此，叶酸是人类健康的重要组成部分。但是，叶酸含量少，提取复杂，稳定性差，对叶酸的分析检测比较困难。而且，虽然FA没有毒性，但是FA含量过高也会引起人们的担心，比如，影响人体对其他元素的吸收，例如锌和维生素B12。因此，建立一种高灵敏度和高选择性的检测样品中FA含量的方法是必要。近年来，人们已经开发了许多FA检测方法，例如酶联免疫吸附测定（ELISA），液相色谱技术（LMST），毛细管电泳（CE），微乳液电动色谱（MEEKC），高效液相色谱（HPLC），荧光法和表面增强拉曼散射（SERS），但其中一些方法具有成本高，选择性差或操作复杂等缺点，因此限制了对叶酸实际样品的检测。在众多分析方法中，荧光法由于灵敏度高，选择性好等优点得到了科研者的青睐，在几十年里得到了快速发展。因此建立一种高灵敏度和高选择性的荧光检测方法是十分必要的。