本发明涉及一种基于干血斑样本的百草枯定性定量检测方法，其特征在于：用干血斑法对样品进行前处理，用高效液相色谱/质谱联用分析法进行检测。本发明不需要大量采血、侵袭性较小，不需要离心分离血液、操作时间短，受艾滋病毒、乙型和丙型肝炎病毒等血源性传播病毒的干扰小、检出限低，并且干血斑允许样品在室温下稳定运输和储存，便于在取样地以外的地点或在其他时间进行复检。