本发明涉及病毒检测技术领域，尤其涉及检测新城疫病毒的引物和探针组合以及试剂盒和检测方法。含有新城疫病毒RNA片段的待测物通过利用该引物和探针可通过反转录重组酶介导等温核酸扩增技术在等温条件下进行大量扩增，操作简单，所需时间短，特异性好、灵敏度高的优点。