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一种辅助全细胞转化合成L-天冬酰胺的方法

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成果名称：	一种辅助全细胞转化合成L-天冬酰胺的方法	关键字：	天冬 , 重组 , 酰胺 , atp , 合成酶 , 合成 , de3 , 表达 , 天冬氨酸 , 激酶	应用行业：	医药制造业
高新技术领域：	生物、医药和医疗器械技术	所在地：	江苏省	知识产权类型：	发明专利
知识产权编号：	CN202010746696.8	成果体现形式：		成果属性：
成果所处阶段：	授权	成果水平：	国内领先	研究形式：
学科分类：		战略新兴产业：	生物	课题来源：
第一完成单位名称：	江南大学	第一完成单位属性：		技术成熟度：
合作方式：	技术转让	交易价格(万)：	3.00	所属十强产业：

本发明公开了一种辅助全细胞转化合成L‑天冬酰胺的方法，本发明利用Ⅲ类多聚磷酸激酶2构建了单酶转化AMP再生ATP的系统，并将其应用于L‑天冬酰胺的生物合成。将来自Deinococcus ficus的Ⅲ类PPK2在Escherichia coli Rosetta(DE3)中表达，酶活力为13.19U·mL‑1。以E.coli Rosetta(DE3)/pET21a‑DfiPPK2‑Ⅲ和B.subtilis WB600/pMA5‑LsaAS‑A全细胞为催化剂催化L‑Asp合成L‑Asn并优化反应条件。结果显示两种重组菌湿细胞在最优反应条件下，并通过两次补料终浓度为60mmol·L‑1的六偏磷酸钠，L‑Asn的得率到达90.15％，比直接添加180mmol·L‑1的六偏磷酸钠高80％。