本发明公开了一种检测人体疲劳状态的方法，属于一种用胶体金试纸检测唾液中疲劳标志物的方法，包括先用疲劳状态检测试纸检测高浓度的唾液待测液，如果疲劳状态检测试纸显示为重度疲劳，再在疲劳状态检测试纸上用低浓度的唾液待测液检测重度疲劳级别；本发明采用非侵入式的方式对人体疲劳状态进行检测，对被测者无创、无痛，无需依赖其他仪器设备、专业操作人员或特定场所，具有操作简单、方便快捷、检测成本低、结果准确直观的优点。