本发明公开了一种利用唾液检测人体疲劳的方法，包括提取收集唾液、向收集的唾液中加入吸附剂和蛋白酶抑制剂、检测唾液中特定蛋白的含量等步骤，是通过检测唾液中特定蛋白的含量来确定健康状况。本发明属于人体蛋白的检测领域，是一种非侵入式的标志物检测方法，不会破坏人体组织，其具有无创、无痛、快速的优点，具有重要社会意义和应用前景。