本发明提供了一种番茄果实转录因子CNR多克隆抗体及其制备方法，本方法包括：(1)构建含有SEQ ID No：1所示核苷酸序列的重组表达载体，将所述重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞获得CNR蛋白抗原；(2)将所述CNR蛋白抗原免疫动物，经血清分离纯化获得番茄CNR蛋白多克隆抗体，利用本发明所提供的方法制备的多克隆抗体，能够特异性识别番茄果实的CNR蛋白，而不能识别番茄果实的其他蛋白，在CNR蛋白的检测和功能鉴定、及其研究中具有广泛用途。CNR蛋白抗体的制备为检测番茄转录因子CNR在果实成熟过程中的表达情况及研究CNR蛋白的功能具有重要意义。