本发明公开了一种马铃薯StRab5b基因的克隆、载体构建和瞬时表达的研究方法，解决的技术问题是马铃薯的晚疫病严重危害马铃薯的生产，研究小G蛋白的StRab5b基因的克隆、载体构建和瞬时表达，分析其在马铃薯抗晚疫病机制中的作用。本发明包括以下步骤：①查找马铃薯StRab5b的基因序列，设计克隆和构建载体所用的引物，对马铃薯的StRab5b基因进行克隆；对马铃薯的StRab5b基因克隆后，用载体pCAMBIA1300‑221，构建出表达载体PCAMBIA1300‑221‑StRab5b‑GFP；②采用步骤①构建出的表达载体注入烟草叶片中，观察表达载体在烟草叶片中的瞬时表达。本发明初步明确StRab5b基因在抗马铃薯晚疫病过程中的功能，为马铃薯抗病育种和新的种质资源的创制和挖掘奠定理论基础。