本发明公开了一种用于实时检测巯基乙酸的一体化荧光试纸及应用。它是将滤纸条浸泡在3.8 mM铜纳米簇溶液中。该试纸可用于对环境中含硫污染物巯基乙酸（TGA）进行实时、快速、可视化检测的荧光试纸。该试纸是通过将具有一定形状的滤纸条均匀地浸润在以谷胱甘肽为保护剂合成的铜纳米簇溶液中，经干燥、定形而制得。该铜纳米簇荧光试纸具有优异的荧光性能，且其荧光可以被巯基乙酸有效猝灭，可实现在实际环境样品中对巯基乙酸的实时快速分析检测，具有极高的应用价值和市场前景。