本发明公开2型猪链球菌生物被膜相关基因Nsub敲除突变株SS2‑ΔNsub，所述突变株SS2‑ΔNsub是将2型猪链球菌的生物被膜相关基因Nsub从第646750位至第649725位之间的编码基因敲除后获得的，所述被膜基因Nsub的全部编码序列为SEQIDNO.1。本发明突变株不仅使菌株的毒力大大降低，不含有抗性筛选标记，实验验证也具有非常好的遗传的稳定性，不存在毒力返强的风险，从而保证了该菌株的安全性。同时Nsub敲除突变株SS2‑ΔNsub的构建方法简单高效，为进一步研究2型猪链球菌生物被膜相关基因Nsub的功能及其致病机制奠定了基础。