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利用mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用
成果名称: | 利用mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用 | 关键字: | hn , 病毒 , 重组 , 细胞 , ad , b16 , 基因 , pshuttle , tyrp , mtert | 应用行业: | 农、林、牧、渔业 |
高新技术领域: | 农业技术 | 所在地: | 天津市 | 知识产权类型: | 发明专利 |
知识产权编号: | CN201510377269.6 | 成果体现形式: | 成果属性: | ||
成果所处阶段: | 授权 | 成果水平: | 国内一般 | 研究形式: | |
学科分类: | 战略新兴产业: | 高端装备制造 | 课题来源: | ||
第一完成单位名称: | 天津农学院 | 第一完成单位属性: | 技术成熟度: | ||
合作方式: | 专利许可 | 交易价格(万): | 0.50 | 所属十强产业: |
本发明公开了一种利用mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用,采用从C57BL/6小鼠的胸腺DNA、小鼠黑色素瘤B16细胞总RNA和新城疫病毒(NDV)LaSota株中分别扩增出的mTERT启动子、mTyr启动子和HN基因,将获得的目的基因克隆到pShuttle‑IRES‑hrGFP‑2穿梭载体中,线性化重组穿梭载体后与骨架载体pAdeasy‑1共转染大肠杆菌BJ5183感受态细胞,使其在BJ5183内进行同源重组,构建了包含上述目的基因的重组腺病毒质粒Ad‑mTERTp‑Tyrp‑HN;将重组腺病毒质粒由PacⅠ酶切后,经脂质体介导转染HEK293细胞,包装获得高滴度的重组腺病毒;评价HN基因在双启动子的联合调控作用下对B16细胞的抑瘤效果。
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苏博晖
15614431192
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