本发明公开了一种用于真姬菇菌种的木屑保藏培养基及其保藏方法，属于菌种保藏领域。所述木屑保藏培养基包括上下两层培养基，所述上层培养基由木屑、麸皮、石膏按照质量比10‑12：2‑3：0.2‑0.3组成，所述下层培养基由木屑组成，所述上层培养基与下层培养基质量比为12‑15：40‑45，所述木屑为浸泡于水或盐溶液至含水量达到最大值或自身含水量达最大值的木屑。本发明的保藏培养基可以使菌种在中期以及长期的保存中依然保持活力高、不退化的特性，且培养基制备以及保藏操作方法简便、培养基价格低廉、获得的菌种纯度高，可在工业生产中得到广泛应用，具有显著的市场前景。