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一株高效表达几丁质酶重组菌的构建及高酶活突变体的筛选

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成果简介
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前景分析

成果名称：	一株高效表达几丁质酶重组菌的构建及高酶活突变体的筛选	关键字：	y10a , r301a , 突变 , ala , pmate , 重组 , rbb , 质粒 , 野生 , 蛋白	应用行业：	制造业
高新技术领域：	先进制造技术	所在地：	天津市	知识产权类型：	发明专利
知识产权编号：	CN201911280564.4	成果体现形式：		成果属性：
成果所处阶段：	授权	成果水平：	国内先进	研究形式：
学科分类：		战略新兴产业：	高端装备制造	课题来源：
第一完成单位名称：	中国科学院天津工业生物技术研究所	第一完成单位属性：		技术成熟度：
合作方式：	专利许可	交易价格(万)：	15.00	所属十强产业：

一株高效表达几丁质酶重组菌的构建及高酶活突变体的筛选。本发明借助重组蛋白技术实现BcchiA1在枯草芽孢杆菌中的高效分泌型表达，解决了大部分微生物几丁质酶分泌量不足的问题。同时，创建一种新的几丁质酶高通量筛选方法，极大地提高了筛选通量和效率。此外，本发明涉及公开几株高酶活几丁质酶突变体，BcchiA1(Y10A)、BcchiA1(R301A)、BcchiA1(E327A)、BcchiA1(Y10A/R301A)、BcchiA1(Y10A/E327A)、BcchiA1(R301A/E327A)和BcchiA1(Y10A/R301A/E327A)，酶活性比野生型BcchiA1分别提高了2.49倍、0.67倍、3.61倍、2.39倍、3.46倍、4.75倍、16.89倍，其中BcchiA1(Y10A/R301A/E327A)酶活性最优。最终，将几丁质酶BcchiA1及其最优突变体BcchiA1(Y10A/R301A/E327A)与来源于Bacillus atrophaeus的单加氧酶BatLPMO10分别协同作用后，可使BcchiA1和BcchiA1(Y10A/R301A/E327A)的水解效率分别提高50.00％和46.71％。