本发明实施例公开了一种用于动物线粒体基因组扩增的通用引物混合物及其设计和扩增方法，以及包含所述通用引物混合物的试剂盒。利用本发明的提供引物混合物或试剂盒和提供的动物线粒体基因组扩增方法，结合新兴的高通量测序技术，可以高效低成本地获得动物线粒体基因组信息。