一种同时测定大青叶中靛蓝与靛玉红含量的方法，属于医药技术领域，大青叶进行预处理并用有机溶剂振摇进行提取，然后将提取液用高效液相色谱进行检验，包括以下步骤：S1精密称取靛蓝、靛玉红对照品适量，加入含磷酸的N,N‑二甲基甲酰胺溶液制成对照品溶液；S2取大青叶，研细，过三号筛，精密称取适量粉末，置具塞锥形瓶中，加入适量含磷酸的N,N‑二甲基甲酰胺溶液后称定重量，振摇，再称定重量，用含磷酸的N,N‑二甲基甲酰胺溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；S3色谱条件：C18色谱柱，以甲醇‑水70：30为流动相，检测波长为289nm；S4分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定。