本发明公开了一种季铵化两性离子交换膜的制备方法，具体涉及一种可用于离子交换、杀菌和其他领域的两性离子交换膜的制备方法，包括：配制二元单体接枝溶液；对商品化高分子膜进行辐照接枝，引入具有阳离子交换功能的磺酸基团和季铵化基团；将该膜材料放入盐酸水溶液中进行质子化反应，产生具有阳离子交换功能的磺酸根离子和具有阴离子交换功能的季铵根离子，得到两性离子交换膜。本发明操作简便，同时解决了磺化过程对接枝链的破坏问题和其带来的环境污染问题，以及通常季铵化反应需两步的繁琐问题。