本发明涉及一种快速制备巯基修饰DNA纳米金复合物(DNA‑AuNP)的方法。采用具有不同长度的寡乙二醇间隔链(OEG)作为间隔链的巯基修饰DNA来进行DNA‑AuNP的快速制备。可显著提高DNA在纳米金表面的上载速率，而且该上载速率随着盐浓度的提高而增加。该方法是一种制备DNA‑AuNP的通用方法，具有不同巯基修饰位置(5'或者3'端)、长度和序列的DNA均适用。该方法不仅适用于线性单链DNA在纳米金上的上载，而且也适用于具有二级结构的DNA探针在纳米金表面上的上载，可一步直接在纳米金表面上载具有二级结构的DNA探针，比如分子信标。该方法适用于不同尺寸的纳米金，特别是稳定性相对较差的大尺寸的纳米金。