本发明提供了一种可注射水凝胶前驱液的制备方法、制备得到可注射水凝胶，以及可注射水凝胶的使用方法。其制备方法是以PEG2000氰乙酸酯和水溶性聚醛为原料，是通过PEG2000氰乙酸酯所提供的活性亚甲基与水溶性聚醛所提供的醛基在PBS催化下，通过Knoevenagel反应原位形成可注射水凝胶，具有优异的生物相容性和生物可降解性，可作为3D细胞培养的载体材料。