本发明公开了一种在苗期鉴定抗冻结球白菜的方法,它包括对幼苗进行冷驯化处理;取叶圆片用液氮快速冷冻并用甲醇提取;以核糖醇作为内标;使用硅烷化试剂N 甲基 N 三甲基硅基三氟乙酰胺(MSTFA)进行衍生化处理;GC MS分析和数据处理等步骤。本发明的方法既可用于稳定遗传群体抗冻性鉴定,也可用于变异单株抗冻性鉴定,该方法样品用量少,对植株伤害小,不影响后期生长和抽薹开花,有利于抗冻材料留种或进行杂交育种。同时,本发明在苗期开展鉴定工作,对土地、人工等要求更低,用时较短,且不受季节影响,适合较大批量抗冻种质资源的筛选。