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体外规模化培养扩增间充质干细胞的方法

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基本信息

  • 地区:

    保定市惠阳街369号保定·中关村创新基地12号楼东单元4层

  • 需求方:

    河北三臧生物科技有限公司

  • 需求背景
间充质干细胞是一种多能干细胞,它具有干细胞的所有共性,即自我更新和多向分化能力。在临床应用也最多,与造血干细胞联合应用,可以提高移植的成功率,加速造血重建,间充质干细胞不仅存在于骨髓中,也存在于骨骼肌、骨外膜和骨小梁中。由于它分化的组织类型十分广泛,因此临床应用价值不菲,间充质干细胞临床应用于解决多种血液系统疾病,心血管疾病,肝硬化,神经系统疾病,膝关节半月板部分切除损伤修复,自身免疫性疾病等方面取得了重大突破,挽救了更多病患的生命。此外,间充质干细胞在神经系统修复及更多方面具有长远的发展前景,间充质干细胞是一种早期未分化的细胞,它具有一切干细胞的特征,具有自我复制、自我分裂、自我更新、多向分化的功能。间充质干细胞主要存在于骨髓腔中,同时也存在于骨小梁等其他结缔组织中。间充质干细胞对造血干细胞的正常发育成熟发挥着重要的作用,间充质干细胞提供了正常造血干细胞生长发育所需要的环境和各种刺激因子。在临床上通过注射间充质干细胞,经常应用于血液系统疾病、结缔组织病以及心血管系统疾病和脑血管系统疾病的治疗,比如在骨髓移植的患者,同时注射间充质干细胞能够更快的促进造血功能的重建。另外间充质干细胞在治疗神经损伤、心肌梗死损伤等也有一定的作用,取得了较好的治疗效果。
  • 难题描述
1.目前常规体外培养扩增间充质干细胞的方法多是采用从脐带中分离培养得到,而制备的方法通常是组织块贴壁法以及酶消化法。使用酶消化法一般采用胶原蛋白酶和胰蛋白酶消化脐带沃顿胶组织后进行大量培养,在这个方法中胰蛋白酶是通过离解细胞间的粘蛋白、糖蛋白而影响细胞骨架从而使细胞分离,对细胞间质的蛋白成分及细胞膜蛋白均有较强的破坏作用,因此造成分离到的干细胞易由于受到损伤而造成活性不佳,难以扩增出理想数目和活性的间充质干细胞。 2.常规体外培养扩增间充质干细胞的方法通常一次性培养细胞较少,难以达到规模化。
  • 技术目标
1.液氮对冻存盒以及冻存管内的充质干细胞进行保存,复苏时,将细胞置于37℃的水浴中,保持1-2分钟完成复苏。 2.所选培养基是经灭菌的液体培养基,培养基缓冲体系为重碳酸盐,在含5%CO2的细胞培养箱中平衡后pH值为7.4。该培养基的配方能够选择性的促进间充质干细胞体外培养中的生长和分化,并为其达到最理想营养平衡状态提供数量上和质量上的保证,培养箱以及培养瓶均经过灭菌处理,整个培养过程能够达到无菌、无污染的状态。所得细胞活性佳、受损率较低,同时能够扩增出理想数目和活性的间充质干细胞。

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  • 联系人:

    黄进峰

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    19933538888

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    保定市惠阳街369号保定·中关村创新基地12号楼东单元4层

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